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大腸桿菌表達純化服務(wù)

大腸桿菌表達系統結構簡(jiǎn)單、遺傳背景清楚、目的基因表達水平高、培養周期短等優(yōu)勢,被認為最廣泛最經(jīng)濟實(shí)惠的經(jīng)典表達系統,近幾十年,大腸桿菌表達系統也不斷發(fā)展和完善,被科研及工業(yè)用戶(hù)大量用于各種重組蛋白表達。該系統主要用于抗原制備、配體制備以及細胞因子和細菌(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等)蛋白的表達。

華美生物在大腸桿菌蛋白表達和純化方面擁有豐富的經(jīng)驗,通過(guò)不斷的優(yōu)化實(shí)驗條件能解決蛋白表達純化過(guò)程中的各種疑難問(wèn)題。

擁有豐富的表達純化經(jīng)驗和專(zhuān)業(yè)技術(shù),通過(guò)不斷的優(yōu)化實(shí)驗條件能解決蛋白表達純化過(guò)程中的各種疑難問(wèn)題。自2007年起的15年里,我們成功開(kāi)發(fā)了7000多種在大腸桿菌中表達的重組蛋白,其中包含數百種高純度的活性蛋白。

請點(diǎn)擊此處查看更多活性蛋白: https://www.cusabio.com/catalog-37-1.html

 

系統優(yōu)勢

  • 遺傳背景清楚;
  • 蛋白表達周期短,易放大;
  • 生長(cháng)速度快,表達水平高;
  • 可選擇載體和融合標簽多;
  • 可調控不同參數得到最適表達。
 

服務(wù)優(yōu)勢

  • 超高性?xún)r(jià)比,低至3500元起;
  • 表達成功率高達98%;
  • 上清率>72%;
  • 貨期短,25個(gè)工作日內即可交付;
  • 產(chǎn)量高達200mg/L。
 

我們承諾

無(wú)風(fēng)險定制,不成功不收費

注:該無(wú)風(fēng)險定制蛋白服務(wù)僅適用于800個(gè)氨基酸以?xún)鹊牡鞍踪|(zhì)。如果您需要表達超過(guò)800個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),我們將按步驟收費。

 

服務(wù)內容

步驟 服務(wù)項目 服務(wù)說(shuō)明 華美生物特色 周期
1 質(zhì)粒構建
密碼子優(yōu)化全基因合成 多個(gè)載體優(yōu)化
為了得到最高的表達量蛋白,多個(gè)載體同時(shí)優(yōu)化,縮短了貨期,讓客戶(hù)有更多的選擇。
5-10工作日
PCR擴增產(chǎn)物酶切連接到PCold-SUMO,pGEX-4T-1,pET22b-JT等多個(gè)融合載體上
轉化TOP10宿主
獲得測序正確的重組質(zhì)粒
2 轉化及菌株篩選
構建重組質(zhì)粒轉化到BL21(DE3)、Rosetta-gami B(DE3)pLysS、C41等宿主, 37℃過(guò)夜培養 多條件優(yōu)化、多宿主選擇
小試中對其溫度、IPTG量進(jìn)行優(yōu)化,優(yōu)化出合適的培養條件,同時(shí)多個(gè)宿主進(jìn)行轉化選擇表達量最高的宿主菌。
5工作日
挑取單菌落進(jìn)行小量誘導表達,SDS-PAGE電泳檢測,保種
進(jìn)行表達條件優(yōu)化,確定最佳表達條件
3 目標蛋白表達及純化
根據小量結果提供1-10L放大體系表達 多條件優(yōu)化上清表達
表達載體和菌株優(yōu)化,超低溫條件誘導,最大程度保持蛋白可溶性達72%以上
12-15工作日
多種表達策略和純化方式同時(shí)進(jìn)行
4 其他(可選)
通過(guò)酶切去除標簽 靈活的附加服務(wù)(可選)
提供多種附加服務(wù),客戶(hù)可根據實(shí)驗需求靈活選擇
3個(gè)工作日
所有蛋白都可以提供無(wú)菌操作和內毒素去除服務(wù) 3個(gè)工作日
5 質(zhì)控
進(jìn)行純度、濃度等檢查,并提供QC報告 詳細的質(zhì)控報告
為每個(gè)項目提供產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)及完善的質(zhì)控報告
3-5工作日
總時(shí)間 25-35工作日
 

案例展示

案例1:

特色:融合表達蛋白采用PreScission酶進(jìn)行酶切,通過(guò)GST親和層析柱上酶切一步純化得到無(wú)標簽蛋白。

蛋白酶切示意圖

泳道1:細胞裂解液(箭頭所指為融合蛋白)
泳道2:穿透液
泳道3:酶切穿透(箭頭所指為目的蛋白)
泳道4:PBS除雜
泳道5:GSH洗脫(箭頭所指為GST標簽蛋白)
泳道6:目的蛋白濃縮

案例2:

特色:此蛋白通過(guò)鎳柱親和層析一步純化得到目的蛋白,純度可以達到90%,產(chǎn)量可以達到20mg/L。

泳道1:細胞裂解液
泳道2:穿透液
泳道3:30 mM 咪唑洗脫
泳道4:60 mM 咪唑洗脫
泳道5:200 mM 咪唑洗脫
泳道6:500 mM 咪唑洗脫

案例3:

特色:同個(gè)項目可以有多個(gè)融合標簽選擇。

N-terminal GST-tagged

泳道1:細胞裂解液
泳道2:穿透
泳道3:GSH洗脫

N-terminal 6xHis-SUMO-tagged

泳道1:60 mM 咪唑洗脫濃縮
泳道2:200 mM 咪唑洗脫濃縮
泳道3:500 mM 咪唑洗脫濃縮


案例4:

特色:蛋白活性。

The Binding Activity of aqpZ with ytfE

Activity: Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized aqpZ at 5 μg/ml can bind human ytfE, the EC50 of human ytfE protein is 197.90-259.70 μg/ml.

 

聯(lián)系信息

    電話(huà):027-87002556

    Q Q:1031906505 點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息

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武漢華美生物工程有限公司成立于2007年12月,是一家集科研、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體的生物高新技術(shù)企業(yè)。并形成了以CUSABIO為品牌的ELISA試劑盒、蛋白、抗體等多種優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,遠銷(xiāo)歐美日德等九十多個(gè)國家。
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