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質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒

質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒包裝

貨號:CSB-PPM02005

樣本:甘油菌種或單克隆菌斑

規格:5T

產(chǎn)品介紹

質(zhì)粒DNA大量抽提技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有廣泛的應用。從基礎研究到藥物開(kāi)發(fā),從基因功能研究到疾病治療,質(zhì)粒DNA的大量制備都是不可或缺的一環(huán)。通過(guò)質(zhì)粒DNA的大量抽提,可以獲得足夠用于后續實(shí)驗的質(zhì)粒,從而進(jìn)行深入的分子分析和功能研究。

華美生物的質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒采用了SDS-堿裂解法來(lái)破碎菌體,得到裂解液后,通過(guò)加入特殊設計的內毒素清除劑,有效去除了其中的內毒素。在特定的條件下,質(zhì)粒DNA樣品在重力作用下流經(jīng)純化柱時(shí),會(huì )與柱子緊密結合。進(jìn)一步的處理后,質(zhì)粒DNA可以被充分洗脫下來(lái)。最后,通過(guò)異丙醇沉淀的方法,實(shí)現質(zhì)粒DNA的濃縮純化,極大地提高了純化的效率。

產(chǎn)品優(yōu)勢:

  • 適用于大量抽提:本試劑盒設計用于抽提150 ~ 300 mL大腸桿菌質(zhì)粒,適合大量質(zhì)粒DNA的提取。
  • 內毒素清除:獨特的內毒素清除劑能有效去除內毒素,保證質(zhì)粒DNA的純度和安全性。
  • 高純度:三步過(guò)柱純化,使質(zhì)粒DNA純度提高,內毒素含量極低,可滿(mǎn)足細胞轉染級要求。
  • 高結合能力:每個(gè)質(zhì)粒純化柱的質(zhì)粒 DNA 最大結合能力達到1.5mg,提高了純化效率。
  • 無(wú)需有毒試劑:整個(gè)實(shí)驗過(guò)程不使用苯酚、氯仿等有毒試劑,降低了對實(shí)驗人員的危害。

產(chǎn)品應用:

提取的質(zhì)粒 DNA 適用于各種應用,包括限制性酶消化、PCR、測序、連接以及各種細胞實(shí)驗中的轉化和轉染。

產(chǎn)品詳情

操作流程

操作流程

驗證數據

驗證數據

樣品上樣量:1 μg

產(chǎn)品組分

試劑名稱(chēng) 5次
Buffer S1 60 mL
Buffer S2 60 mL
Buffer S3 60 mL
RNase A 18 mg
Wash Buffer 100 mL*2
ER Buffer 18 mL
Elution Buffer 60 mL
TE Buffer 5 mL
Plasmid Purification MaxiPrep Column 5根

產(chǎn)品保存

RNase:-20°C;

其他組分:15-25°C。

常見(jiàn)問(wèn)題與解答

Q:質(zhì)粒裂解過(guò)程中,溶液S2加完呈現什么狀態(tài)是正常的?

A:S2加完后,溶液變?yōu)榈S色的澄清狀態(tài),質(zhì)地略粘稠,打開(kāi)蓋子時(shí)略有拉絲。

Q:質(zhì)粒中和過(guò)程中,溶液S3加完呈現什么狀態(tài)是正常的?

A:S3加完后,溶液出現白色蛋花狀沉淀,此時(shí)需要觀(guān)察是否還存在P2溶液加完后的粘稠狀團塊,如果存在則需要加大幅度混合均勻。

Q:S2溶液在秋冬為什么會(huì )析出白色絮狀沉淀?

A:S2溶液的成分是SDS和NaOH,其中的SDS在低溫時(shí)容易結晶析出,在使用前需要提前30-60min放入37℃烘箱或者水浴鍋,直至試劑重新恢復澄清透明即可使用。

Q:如果質(zhì)粒上清離心完還略微渾濁怎么辦?

A:如果是批量出現該問(wèn)題,可以考慮離心時(shí)間是否過(guò)短,可以適量增加離心時(shí)間看看;如果是個(gè)別樣品渾濁,可以分裝到EP管內重新離心3-5min,再吸取上清過(guò)濾,個(gè)別上清液肉眼看是澄清的,但是過(guò)濾時(shí)非常堵塞,也可以重新離心后再過(guò)濾。

Q:如果質(zhì)粒跑膠時(shí)有RNA殘留怎么辦?

A:如果是批量的有RNA殘留,可以適當降低異丙醇的量,正常情況異丙醇的量是洗脫液的70%,但是異丙醇過(guò)多會(huì )吸附過(guò)多的DNA和RNA片段,具體用量可以根據具體實(shí)驗情況調整;此外還可能是RNA酶失活,在第一步重懸菌體的時(shí)候RNA并沒(méi)有消化完全。