酵母表達(dá)純化服務(wù)

系統(tǒng)優(yōu)勢

• 無自產(chǎn)內(nèi)毒素；
• 產(chǎn)物可翻譯后修飾：糖基化、磷酸化、酰酯化等，蛋白具有生物活性的可能性更高；
• 產(chǎn)物可正確折疊和高效分泌；
• 性質(zhì)較原核表達(dá)的蛋白質(zhì)更加穩(wěn)定，特別適合于表達(dá)和制備具有功能的蛋白：如結(jié)核類蛋白、防御素類蛋白、白介素蛋白及細(xì)胞因子等。

服務(wù)優(yōu)勢

• 無風(fēng)險定制，不成功不收費；
• 特有的PickRight技術(shù)，轉(zhuǎn)化后免篩選直接可獲得高表達(dá)量菌株，相比傳統(tǒng)篩選節(jié)省5-10個工作日；
• 高產(chǎn)量：搖瓶培養(yǎng)條件下高達(dá)100mg/L；
• 高性價比：價格低至5200元起；
• 貨期短：最短35工作日即可交付。

我們承諾

注：該無風(fēng)險定制蛋白服務(wù)僅適用于800個氨基酸以內(nèi)的蛋白質(zhì)。如果您需要表達(dá)超過800個氨基酸的蛋白質(zhì)，我們將按步驟收費。

特色表達(dá)體系

● pPic9k-JT質(zhì)粒+GS115菌株高效表達(dá)

載體特色

• 攜帶有AOX1強啟動子，含有alpha分泌因子可高效分泌表達(dá)；
• 無縫克隆連接不懼任何內(nèi)切酶位點；
• 多個線性化位點：SalⅠ，SacⅠ，BglⅡ；
• 原核階段可進(jìn)行Amp和Kan雙抗性篩選陽性菌株；
• 真核階段可進(jìn)行His+和G418篩選高表達(dá)菌株；
• 改造過的多克隆位點，克隆不受目的基因中潛在的核酸內(nèi)切酶位點限制；
• 載體自帶his 標(biāo)簽，方便克隆與純化。

● pPic9k-SUMOSTAR質(zhì)粒+GS115菌株高效表達(dá)

載體特色

• 攜帶有AOX1強啟動子，含有alpha分泌因子可高效分泌表達(dá)；
• 含有SUMOSTAR融合蛋白，具有很強促表達(dá)能力；
• 無縫克隆連接不懼任何內(nèi)切酶位點；
• 含有EK酶切位點，酶切可得到無標(biāo)簽蛋白；
• 多個線性化位點：SalⅠ，SacⅠ；
• 原核階段可進(jìn)行Amp和Kan雙抗性篩選陽性菌株；
• 真核階段可進(jìn)行His+和G418篩選高表達(dá)菌株；
• 改造過的多克隆位點，克隆不受目的基因中潛在的核酸內(nèi)切酶位點限制；
• 載體自帶his 標(biāo)簽，方便克隆與純化。

案例展示

案例1: 酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)高純度蛋白

難點：酵母胞內(nèi)表達(dá)，破菌后純化，可以看出裂解液中雜蛋白非常多（泳道1），目的蛋白非常不明顯，經(jīng)過酵母系統(tǒng)特有的層析系統(tǒng)一次純化，用SDS-PAGE檢測看不到雜帶，純度達(dá)到95%以上（泳道6-7）。

特點：酵母分泌表達(dá)，蛋白表達(dá)后直接分泌到培養(yǎng)基中，基本無雜蛋白，本身純度就高達(dá)90%以上，通過純化主要是去除色素及培養(yǎng)基中其他殘留物質(zhì)，只留下在適宜緩沖中的目的蛋白。

案例2: 酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)大分子量蛋白

難點：700氨基酸以上，81kDa，為了得到較高純度，選擇分泌載體進(jìn)行表達(dá)，成功表達(dá)并分泌出來。

案例3: 酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)小分子蛋白

案例4：酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)N-型糖基化修飾蛋白

特點：接近天然蛋白的修飾，尤其是糖基化修飾在酵母表達(dá)系統(tǒng)特別明顯，用SDS-PAGE檢測呈彌散狀條帶且偏大，經(jīng)過去N-型糖基化修飾的Endo H酶消化，帶型變實且大小與理論值吻合。