穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并整合到細(xì)胞的染色體上，使目的抗原在宿主細(xì)胞膜表面進(jìn)行長(zhǎng)期穩(wěn)定的表達(dá)。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株在生物學(xué)研究中扮演著非常重要的角色，廣泛用于重組蛋白和單克隆抗體生產(chǎn)、藥物篩選、基因功能研究等應(yīng)用。
華美生物多年從事蛋白表達(dá)研究，具有大量穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，能夠有效提高穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的生產(chǎn)能力，改善實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為客戶提供過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株和報(bào)告基因細(xì)胞株的從基因序列到穩(wěn)轉(zhuǎn)株交付的一站式服務(wù)。
指基于某一細(xì)胞系構(gòu)建的持續(xù)過表達(dá)或干擾某特定基因的細(xì)胞系，其特性在于它們能夠持續(xù)地表達(dá)特定的基因，而不是像瞬時(shí)轉(zhuǎn)染那樣只能短暫地表達(dá)。
應(yīng)用領(lǐng)域：
- 基因功能研究
- 藥物篩選
- 疾病模型建立
- 小分子藥物和抗體藥開發(fā)
通過分子生物學(xué)克隆技術(shù)，將特定的報(bào)告基因（例如熒光素酶）插入到目標(biāo)細(xì)胞的染色體中，經(jīng)過篩選培養(yǎng)，獲得能夠穩(wěn)定表達(dá)報(bào)告基因的細(xì)胞株。
應(yīng)用領(lǐng)域：
- 基因表達(dá)調(diào)控研究
- ADCC/ADCP功能驗(yàn)證
- 蛋白質(zhì)相互作用（信號(hào)通路）研究
- Cross-linking藥物評(píng)價(jià)
服務(wù)優(yōu)勢(shì)：
完善的服務(wù)平臺(tái)
具備完善的細(xì)胞、抗體、蛋白等服務(wù)平臺(tái)，能夠提供從穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建到重組蛋白生產(chǎn)等一站式技術(shù)服務(wù)
嚴(yán)格的質(zhì)控體系
雙重檢測(cè)細(xì)菌、支原體等微生物，100%確保無污染；進(jìn)行細(xì)胞活率檢測(cè)，保證交付質(zhì)量
穩(wěn)定傳代
高質(zhì)量交付標(biāo)準(zhǔn)，保證穩(wěn)定性傳代>20代
專業(yè)技術(shù)支持
專業(yè)技術(shù)人員定期匯報(bào)項(xiàng)目進(jìn)展，以保證項(xiàng)目順利推進(jìn)
技術(shù)路線：
服務(wù)內(nèi)容及周期：
宿主細(xì)胞檢測(cè)（1-2周）
- 細(xì)胞存活率檢測(cè)；
- 細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)；
- 細(xì)菌真菌檢測(cè)；
- 支原體檢測(cè)。
慢病毒表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建（2-3周）
- 密碼子優(yōu)化；
- 全基因合成；
- 構(gòu)建慢病毒表達(dá)質(zhì)粒。
慢病毒包裝（1-2周）
- 將表達(dá)質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)宿主細(xì)胞，進(jìn)行慢病毒包裝。
Cell Pool篩選及驗(yàn)證（1-2周）
- 陽性細(xì)胞篩選；
- Cell pool表達(dá)量檢測(cè)。
單克隆篩選及驗(yàn)證（2-3周）
- 單細(xì)胞進(jìn)行鋪板，并驗(yàn)證單克隆的表達(dá)。
細(xì)胞株質(zhì)控（1-2周）
- 單克隆擴(kuò)大培養(yǎng)，凍存；
- 復(fù)蘇存活率檢測(cè)；
- 細(xì)菌真菌及支原體檢測(cè)。
宿主細(xì)胞檢測(cè)（1-2周）
- 細(xì)胞存活率檢測(cè)；
- 細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)；
- 細(xì)菌真菌檢測(cè)；
- 支原體檢測(cè)。
報(bào)告基因表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建（2-3周）
- 密碼子優(yōu)化；
- 全基因合成；
- 構(gòu)建慢病毒表達(dá)質(zhì)粒。
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞（1-2周）
- 構(gòu)建好的報(bào)告基因表達(dá)質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)細(xì)胞。
Cell pool 篩選及功能活性驗(yàn)證（1-2周）
- 陽性細(xì)胞篩選；
- Cell pool表達(dá)量檢測(cè)；
- 藥物誘導(dǎo)檢測(cè)信號(hào)通路。
單克隆篩選及驗(yàn)證（7-10周）
- 單細(xì)胞進(jìn)行鋪板，并驗(yàn)證單克隆的表達(dá)。
細(xì)胞株質(zhì)控（1-2周）
- 單克隆擴(kuò)大培養(yǎng)，凍存；
- 復(fù)蘇存活率檢測(cè)；
- 細(xì)菌真菌及支原體檢測(cè)。
客戶提供：
所需細(xì)胞株的靶點(diǎn)及宿主細(xì)胞信息
最終交付：
① Pool細(xì)胞或者單克隆細(xì)胞；
② 質(zhì)檢報(bào)告（COA）及項(xiàng)目結(jié)題報(bào)告。
